α-淀粉酶(枯草桿菌)使用的一些常用技術(shù)分析
更新時(shí)間：2017-08-21 點(diǎn)擊次數(shù)：2073
α-淀粉酶(枯草桿菌)合適的底物分子是酚類(lèi)，以及芳香性和脂肪性的胺類(lèi)。它們催化的過(guò)程是底物的單電子氧化，生成相應(yīng)的活性自由基。酶分子中含有4個(gè)銅原子構(gòu)成的簇作為催化核心，實(shí)施氧化還原過(guò)程。在催化核心中銅原子的相互作用引起了強(qiáng)烈的電子吸收，產(chǎn)生了典型的藍(lán)色。為α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的循環(huán)過(guò)程，1分子的氧被還原為2分子的水同時(shí)4個(gè)底物分子氧化產(chǎn)生4個(gè)自由基，這些活性的中間物隨后轉(zhuǎn)變?yōu)槎垠w、寡聚體和高聚物。
除了漆酶80498-15-3在工業(yè)中巨大的應(yīng)用前景外，目前也被用有機(jī)合成中。其中一個(gè)很重要的方面是闡明漆酶的作用機(jī)制和開(kāi)發(fā)新的中介分子。
因?yàn)?alpha;-淀粉酶(枯草桿菌)已超過(guò)地應(yīng)用木質(zhì)素的去除，漆酶的應(yīng)用從原先是針對(duì)酚類(lèi)拓展到其它的非酚類(lèi)的取代基，例如圖4b中羥基變?yōu)橥?。漆酶和可以將寡糖中的糖基C6的羥基氧化為羧基。在這些有機(jī)合成中，漆酶的催化機(jī)制可分為3種類(lèi)型：一是由化合物催化的電子轉(zhuǎn)移；二是由化合物催化的自由基轉(zhuǎn)移反應(yīng)；三是圖化合物催化的離子氧化反應(yīng)。一般在水中的Cu+2/Cu+的離子氧化還原電位僅0.15 V，而漆酶催化的離子氧化反應(yīng)，相應(yīng)的電位增大為0.6~0.8V。
α-淀粉酶(枯草桿菌)催化的*反應(yīng)條件；
α-淀粉酶(枯草桿菌)的底物多數(shù)是溶解度很差的分子，因此，在選擇反應(yīng)條件時(shí)，經(jīng)常需要使用有機(jī)溶劑或?qū)⑵崦腹潭ɑ?/div>
在催化雌二醇氧化反應(yīng)中，選用的兩相的體系，水-乙酸乙酯。就這樣的體系而言，優(yōu)點(diǎn)是酶在水中比較穩(wěn)定不易失活，缺點(diǎn)是兩相反應(yīng)，需經(jīng)過(guò)底物的分配，速度慢。如果選用和水能混合的有機(jī)溶劑，成為均相反應(yīng)，zui大的問(wèn)題是酶的穩(wěn)定性差，酶活性降低。利用去垢劑構(gòu)出的反相微團(tuán)，可能維持酶的活性。
α-淀粉酶(枯草桿菌)將酶固定化是目前常用的穩(wěn)定酶的一種方法，可以在有機(jī)溶劑中仍不使酶失活。有趣的是，在使用固定化酶時(shí)曾發(fā)現(xiàn)，有機(jī)溶劑四氫-2-萘醇可影響產(chǎn)物的比例，這似乎提示了有機(jī)溶劑影響了酶的特異性。
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